一、试验内容
将 100 只 21 日龄健康樱桃谷肉鸭分为 5 组(饮水组、肌肉注射组、喷雾 组、接触组及对照组) ,每组 20 只 ,5 组分别饲养于5 个不同的生物安全型隔离器中 。
对照组不做任何处理；
饮水组经口腔灌服RA菌液 0.5 mL/只 ；
肌肉注射组腿部肌肉注射RA菌液0.5 mL/只；
喷雾组通过喷洒菌液的方式感染肉鸭，将 10 mLRA菌液加入至100 mLPBS溶液中，并置于无菌喷壶中，关闭隔离器送风30 min后，分3次进行喷洒，每次间隔3 min，喷洒结束后打开送风；
接触组随机选择10只肉鸭(不计入结果)，腿部肌肉注射RA菌液0. 5 mL/只 ，另外10 只（计入结果）不做处理。
二、试验结果1. RA 不同感染途径对 RA肉鸭存活率的影响
攻毒 10 d 后各组存活率的统计由下表可知 ：
各组存活率的排序从低到高依次为肌肉注射组（20%）、饮水组（55%）、接触组（70%）、 喷雾组（80%） 和对照组（100%）；
饮水组、肌肉注射组、喷雾组和接触组的存活率显著低于对照组（P<0. 05），肌肉注射组的存活率显著低于饮水组、喷雾组和接触组（P<0. 05） ，而接触组、饮水组和喷雾组的存活率差异不显著（P>0. 05)。
由不同途径感染 RA 后肉鸭的生存曲线可见，各感染组首只肉鸭死亡时间从早到晚依次为肌肉注射组、饮水组、喷雾组、接触组。
其中肌肉注射组发生死亡的时间最早，攻毒后第2天开始就有肉鸭死亡，第 3~4天达到死亡高峰，第4天的存活率仅为 30%；
死亡时间最晚的为接触组，第 8天才开始死亡；
而饮水组和喷雾组分别于第 4天和第 5天开始死亡。
2. RA 不同感染途径对肉鸭发病率的影响
攻毒10 d 后各组发病率的统计结果见下表，各组发病率的排序从高到低依次为 肌肉注射组（100%）、饮水组（95%）、喷雾组（85%）、接触组（60%）和对照组（0）；饮水组、肌肉注射组、喷雾组 和接触组肉鸭的发病率显著高于对照组（P<0.05），饮水组和肌肉注射组显著高于接触组（P<0.05），肌肉注射组、饮水组、喷雾组之间差异不显著（P>0.05），喷雾组和接触组之间差异不显著（P>0.05）。
3. RA 不同感染途径对肉鸭病理剖检特征的影响
结果显示：对照组肉鸭心脏和肝脏正常(下图A)，其他 4组表现为不同程度的心包炎、肝周炎和气囊炎；
其中饮水组(下图B)、肌肉注射组(下图C)和接触组(下图D)的纤维性渗出物较少，尤其接触组，仅心包有少量纤维素性渗出物；
而喷雾组(下图E)心包和肝脏的纤维素性渗出物最多，心脏和肝脏部位形成了较厚的渗出性包膜，并且肝脏的渗出物出现干酪化趋势。
三、讨论1. RA 不同感染途径对肉鸭存活率的影响
RA 可通过呼吸道或皮肤伤口,特别是足部皮肤伤口传播。带菌肉鸭会向环境中持续排菌，而健康肉鸭又会通过被污染的饲料、饮水、鸭舍环境等感染 。有研究结果表明，将 RA通过皮下注射和静脉注射的方式感染肉鸭，肉鸭表现为高死亡率。
本研究选择的4种攻毒方式是为了模拟肉鸭养殖过程中RA可能的感染途径，饮水组模拟饮水感染，肌肉注射组模拟皮肤伤口感染，喷雾组模拟呼吸道感染，接触组模拟接触感染，10 d后各组存活率的排序从低到高依次为肌肉注射组（20%）、饮水组（55%）、接触组（70%）、喷雾组（80%）和对照组（100%），肌肉注射组的存活率显著低于其他4组；
生存曲线分析也表明肌肉注射组发生死亡的时间最早，攻毒后第2天开始就有肉鸭死亡，第 3~4天达到死亡高峰，第 4天的存活率仅为 30%，与崔松奇等用6型RA菌株腿部肌肉注射肉鸭后第 3~6天为发病与死亡高峰的结果相近，但是本研究中肌肉注射组肉鸭存活率更低，这可能是因为同一血清型不同RA菌株之间的毒性存在差异，并且本研究观察时间更长，肉鸭死亡率更高。
RA通过肌肉注射感染肉鸭后，会快速扩散进入到全身血液系统中，并迅速在靶器官如心脏、肝脏和脾脏中繁殖，产生大量内毒素，损伤机体内脏器官而引起肉鸭死亡 。肉鸭呼吸道与全身气囊相连的解剖学特点使得RA可通过呼吸道感染，然后扩散至全身。本研究结果表明，喷雾组于攻毒后第 5天开始死亡，说明通过呼吸道感染的RA进入血液循环的速度稍慢于肌肉注射，这与贺宝峰对大肠杆菌不同感染途径的研究结果一致。
对于饮水感染RA而言，RA进入消化系统中，会受到各种消化酶的化学作用，虽然不能快速突破机体消化系统屏障，但也会通过影响肠道屏障功能、损坏肠黏膜进入血液循环，向机体内各组织器官扩散，引起肉鸭死亡。
以上结果说明了RA 通过不同途径感染肉鸭时，肉鸭的存活率不同，其中皮肤伤口感染对肉鸭的致病性最强，肉鸭存活率最低。
2. RA 不同感染途径对肉鸭发病率和病理特征的影响
在本研究中，虽然饮水组和喷雾组的存活率显著高于肌肉注射组，但是这三组的发病率差异不显著。
从各组的病理剖检结果可以看出：肌肉注射组几乎未出现明显的肝周炎症状；
而喷雾组表现为明显的心包炎和肝周炎症状，且肝脏的渗出物出现干酪化趋势。
这主要是由于 RA感染后进入血液循环中首先在心脏中大量繁殖，然后再转移至肝脏，纤维素性肝周炎出现的时间要晚于纤维素性心包炎。接触组最晚发生死亡，并且发病率相对较低，存活率相对较高，从病理剖检结果也可以看出接触组的症状相对较轻，只表现为较轻的心包炎。
虽然空气传播是 RA感染的主要途径，但由于本研究的致病性试验在隔离器内进行，空气为流通的洁净空气，因此不能完全模拟实际养殖过程中的接触感染；并且接触组10只肉鸭通过肌肉注射造模，发病急，死亡快，发病鸭失去采食和饮水的能力，向饲料和饮水中排毒机会也较临床低，这些因素导致接触组感染 RA的概率较其他组低，同时存活率也较高。而在实际养殖过程中，RA会通过棚舍中灰尘、水蒸气、饲料、饮水等多种途径感染肉鸭，使得肉鸭发病率更高，这可能是 RA传播速度较快的主要原因。
四、结论
本试验结果表明，临床分离的6型RA菌株可通过饮水、皮肤伤口、呼吸道、接触四种途径感染肉鸭；
其中皮肤伤口感染对肉鸭的致病性最强，引起的死亡率最高；
而呼吸道感染肉鸭的病理特征最为明显，可引起严重的心包炎和肝周炎。
