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猪链球菌毒力菌株的定义是什么？
大多数猪的链球菌感染是由少数血清型的菌株引起的。虽然造成临床感染的血清型分布因地理位置不同而有所差异，但血清2型菌株是引发全球大多数猪只和人类感染的罪魁祸首，因此它历来被视作最常见的、毒力最强的血清型。然而，这仅限于欧洲和亚洲。此外，血清1和14型也被称为高致病性菌株。事实上，已经证明西方国家的血清1、2和14型的高毒力菌株大多属于谱系组1（主要是ST1）（ST：序列类型）。这些菌株具有一些毒力标记，如猪链球菌溶血素（SLY）、溶菌酶释放蛋白（MRP）和细胞外蛋白因子（EF）。编码这些蛋白的基因可以通过PCR检测出来，这在一些实验室被用于常规诊断。除了这个血清型，近年来，几个欧洲国家发现了血清9型的致病性菌株。这些从病猪中分离出来的菌株（与从健康猪的扁桃体中分离出来的菌株不同）大多属于特定的STs（如ST16、ST123和ST125），并产生猪链球菌溶血素和溶菌酶释放蛋白的一个变体。有趣的是，要使用这样的 "毒力 "血清9 型菌株来诱发疾病，这并不容易，通常需要高水平的静脉内或气管内攻毒才可以。鼻内感染通常不会诱发疾病，即使是吃不到初乳的剖腹产的仔猪，在鼻内攻毒后，也不会发病。
在美国分离的菌株如何呢？一个引人注目的发现是，在北美从病猪上分离出的猪链球菌血清2型菌株的百分比低于世界其他地区。此外，在加拿大和美国很少报告人类感染病例。事实上，已经证明北美的血清2型菌株毒性较低，与世界其他地区（如欧洲和亚洲）的致病菌株在基因上并无关联。北美血清9型菌株也有所不同，属于各种不同的ST，通常不致病。然而，高致病性的血清1和14型（CC1，ST1）在这两个国家都存在。另一方面，大多数病猪上分离出的菌株血清型和其他地方有所不同（如血清1/2型，在美国最普遍）。毒力标记（MRP、EF和SLY）的分析并没有太大作用，因为大多数血清2型菌株检测后，SLY和EF是阴性的，血清9型菌株则是SLY阴性。在拉丁美洲，收集到的信息并不多，血清2型菌株的毒力高低可能取决于遗传（地理区域）。阿根廷的数据（该国有20个多个人类感染病例，是整个美洲人类感染最多的国家）表明，高毒力的血清2型CC1（ST1）菌株广泛存在，类似于在欧洲观察到的情况。巴西是拉丁美洲最重要的养猪生产国，但其相关数据缺失。此外，没有关于人类病例的报告，这可能表明人类医学实验室可能存在误判。
链球菌相关性疾病是否只取决于感染的是毒力菌株呢？
与猪链球菌相关的疾病是复杂的。仅仅存在一个潜在的毒力菌株，并不一定会引发临床症状。有时在没有这种菌株感染时，也能观察到临床症状。除血清1、2、9和14型之外，其他血清型菌株的毒力几乎是未知的，这些毒株没有毒力标记，也没有经过验证的感染猪只的模型，因为在大多数情况下，感染了其他血清型菌株的猪只不会发病。然而，这些菌株通常出现在与猪链球菌相关的疾病中，还出现在北美洲的农场中。这仍然是我们在诊断链球菌感染时面临的主要挑战之一：如何确定从患病动物身上分离出来的某个菌株（非血清1、2、9或14型）就是引发农场疾病的致病菌呢？我们通常建议至少剖检同一批次的3头猪，检测三个批次。如果从这些猪只的大部分内脏器官（除肺部外）中分离出纯的、占主导地位的细菌，并且血清分型显示，只有这一种或极少数血清型，我们就可以得出结论，这些菌株可能是重要的致病菌株。如果结果不能那么确定，我们应分析更多的动物：如果最后检出来有4-5个或更多的血清型，在计划使用自家苗之前，应考虑到其他容易引发疾病的因素（见下文）。如果菌株不能明确分型，分析起来就更加复杂：这些都是同一菌株吗？还是不同的不能分出血清型的菌株共同引发疾病？这些问题只能通过对这些菌株的测序和比对来回答。
实际上，当发生多个菌株感染时，其他因素可能共同影响着疾病状况（图2）。然而，猪链球菌也是个例外，因为一切皆有可能。在罕见的情况下，3-4个不同的菌株共同感染猪只（例如：血清1、2和14型，都是ST1，或者一个血清2型 ST1和一个血清9型 ST16），这种情况会让诊断更加复杂。我们最近分离出了血清2型（一头猪）和血清14型（另外一头猪）的纯培养物，两者同时影响猪群，引发猪只死亡。
图 2: 引起猪链球菌相关疾病的因素
毒力菌株的存在无疑是一个重要因素。然而，与其他病原体的混合感染很可能会引发临床症状。到目前为止，最重要的是混合感染是猪场还感染了猪繁殖与呼吸系统综合征（PRRS）。尽管农场数据清楚地表明，感染过猪繁殖与呼吸系统综合征的农场更容易出现猪链球菌病，但这其中的确切机制仍不清楚。也有研究表明，感染过伪狂犬病毒的猪只更容易患有猪链球菌病。猪流感病毒（SIV）也可能加重某些血清型的猪链球菌引起的感染，这些血清型的链球菌的囊膜中含有唾液酸：血清2型，也有血清1、1/2和14型。这种感染如何对由其他血清型（表面没有任何唾液酸）引起的疾病产生影响，尚不清楚。不幸的是，没有关于其他混合感染的科学数据，如由猪圆环病毒、支原体或其他病原体引发的混合感染。猪链球菌与副猪嗜血杆菌的共同感染（引发临床疾病）似乎很罕见。人们还认为霉菌毒素也是一种致病因素，让猪只更易发病，但从未进行过科学的研究。
人们还认为，环境因素可能会极大地影响与链球菌相关的疾病的爆发，例如通风不良、湿度高、卫生条件差以及昼夜温差大。在此，有必要说明如何使用毒力菌株进行鼻内实验性攻毒。如果将高浓度的链球菌血清2型菌株接种到猪的鼻腔中，通常很少或不能观察到临床症状。应先用醋酸刺激鼻粘膜，然后再感染毒力菌株。此时，可能会观察到临床症状，这还取决于所在农场的状况。这表明，环境因素，如高浓度的灰尘和氨气（造成刺激），可能会让动物对疾病的易感性大大增强。如果让受感染的动物遭受应激，疾病繁殖的几率将大幅上升。尽管猪链球菌可能是疾病的主要病原体，但科霍法则有时并不容易在这种棘手的病原体上重现。
管理因素也可能影响与猪链球菌有关的疾病的进一步发展。例如，交叉寄养过度、饲养密度过大、剪牙和断尾（关节炎）、打耳缺（关节炎）、不同日龄的猪混群、保育猪对固体饲料的适应性差以及维生素E水平低。
最后，我们的研究表明，动物的免疫状态是非常重要的。的确，大多数临床病例都发生在母源抗体下降时（5-9周龄），此时仔猪自身抗体还没有产生。实际上，仔猪自身抗体从9-10周龄开始慢慢增加：没有人知道这种抗体是专门针对猪链球菌的，还是针对扁桃体中存在的其他细菌抗原所产生的。这些抗体总是存在于猪体内（即使断奶后猪只并没有感染与猪链球菌有关的临床疾病），它们随着猪只年龄的增长而增多，并且可能具有保护作用。这就可以解释为什么在成年猪只中很少观察到临床病例。
未完待续……
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