建立基于RAA-CRISPR Cas12a的 小反刍兽疫病毒N基因和M基因诊断方法
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2024/9/23 18:32:48 关注:482 评论: 我要投稿
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小反刍兽疫(Peste des petits ruminants,PPR)是一种急性、高度传染且致命的疾病,影响家养和野生的小型反刍动物,由山羊麻疹病毒(Morbillivirus caprinae,也称为小反刍兽疫病毒(PPRV))引起。本研究开发了一种基于RAA-CRISPR Cas12a快速检测PPRV的方法,该方法设计了针对PPRV-N(核衣壳蛋白)和PPRV-M(基质蛋白)片段的CRISPR RNA和RAA引物。通过筛选和优化构建了反应体系,该方法在37℃下50min内即可完成检测。对携带PPRV N和M基因片段的质粒进行梯度稀释检测,结果显示最低检测限为10拷贝/μL。与相关病毒无交叉反应,并成功检测到所有测试的PPRV谱系,此外,该方法还表现出良好的重复性。对临床样本进行检测,结果表明,RAA-CRISPR Cas12a方法与RT-PCR具有良好的一致性。
原文链接:
?https://pubmed.ncbi.nlm.nih.gov/38876255/?
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文章来源:中国动物卫生与流行病学中心 文章编辑:一米优讯 |
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