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鸭圆环病毒对于肉鸭产业的威胁逐渐明确（下）
现代畜牧网 http://www.cvonet.com 2024/8/15 8:38:05 关注：442 评论： 我要投稿
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上篇文章我们主要对Lei X等人文章中所提及的对鸭圆环病毒（DuCV）流行病学、临床症状和病理学相关研究进行分享。本篇文章中我们将对DuCV病毒的分离和培养、疫苗和抗病毒疗法、诊断和预防措施等主题进行讨论。
1. 病毒分离和培养
在已建立的细胞系中分离和繁殖DuCV或其他禽类病毒，如鸭瘟病毒（DPV）、鹅星状病毒（GAstV）和鹅细小病毒（GPV），这是一个重大挑战。然而，DuCV核酸通常在仅仅四次传代后就检测不到了。尽管DuCV的有效分离技术还没有被鉴定出来，研究人员一直在寻找可行的方法，从番鸭获得的三种细胞系GE1.CR，AGE1.CR.pIX和AGE1.CS，它们对DuCV具有敏感性，其中AGE1.CR.pIX细胞系在病毒感染过程中表现出最高的产量和敏感性，一个感染周期大约需要12至14小时。另一项研究利用北京鸭的外周血单核细胞（PBMC）繁殖DuCV，虽然这些细胞株可以被DuCV感染，但它们表现出相对较低的病毒产量。通过优化病毒感染方案或修饰这些细胞，可以实现提高病毒产量，可能使这些细胞株用于疫苗开发和生产。然而，需要进一步研究DuCV本身以及其感染宿主细胞的机制。
2. 诊断和检测方法
由于DuCV感染的临床症状较轻，目前诊断主要依靠分子诊断方法，标准方法如聚合酶链式反应（PCR），实时荧光定量PCR，主要采用核酸探针，能够有效地鉴定DuCV的存在或辨别各种基因型，灵敏度高达10个拷贝；为了进一步提高DuCV检测在混合感染中的灵敏度和特异性，还可以采用多重PCR和环介导等温扩增（LAMP）技术。“重组酶辅助扩增-侧流层析试纸条（RAA-LFD）”检测方法可以在37℃条件下20 min检测到反应产物，值得注意的是，DuCV与其他圆环病毒具有高度的序列同源性，尽管这些病毒不会感染鸭，但可能会污染样品。因此，为了提高特异性，必须设计出避开同源区域的引物和探针。
DuCV的血清学检测技术主要涉及ELISA，通常使用DuCV的Cap蛋白作为包被抗原。不同基因型之间的抗原变异会导致交叉反应性降低，并且包被抗原也可能与其它病毒抗血清产生非特异性反应，因此需要谨慎考虑。
3. 疫苗和抗病毒药物
由于缺乏用于大规模繁殖DuCV的体外细胞培养系统，阻碍了商业疫苗的可获得性，需要推进新型疫苗和抗病毒化合物的研究和开发。一些研究已经利用外周血单核细胞（PBMC）来分离和繁殖DuCV，并研制了一种鸭用灭活苗，用该灭活苗免疫鸭，未出现羽毛异常、生长抑制，法氏囊、脾脏和胸腺中未见病变或淋巴细胞凋亡，所得血清显示出较高的中和抗体滴度。然而，分离PBMC的劳动密集型性质对DuCV灭活疫苗的大规模生产造成了显著的瓶颈。
感染性克隆可作为DuCV的候选疫苗。已有研究发现了产生DuCV感染性克隆的方法，并对拯救病毒在鸭子中的感染特征进行了研究。数据显示，虽然拯救病毒与亲代病毒非常相似，但其致病性和复制能力均降低。此外，感染性克隆可以揭示病原体的传播途径、生命周期和复制机制，从而阐明疾病的起源和传播模式，还可以探索病原体与宿主的相互作用、疾病机制，通过构建具有特定基因缺失或突变的感染性克隆，可以评估这些基因在致病过程中的作用，有助于了解疾病进展、宿主免疫应答，以找出干预策略和靶点药物。
亚单位疫苗通常由特定的病毒组分或抗原组成，是DuCV的另一种潜在疫苗候选途径，这些途径具有安全性高、稳定性好、风险低、可定制性强等特点，DuCV的Cap蛋白具有较高的免疫原性，含有DuCV的主要抗原表位，是亚单位疫苗的首选抗原，此外，Cap蛋白可以自组装成病毒样颗粒（VLP），模仿野生型病毒颗粒的形态，更好地刺激宿主的免疫应答，具有作为候选疫苗的巨大潜力。
虽然目前还没有有效的抗DuCV感染的商业药物，但某些药物可能会减轻DuCV的致病性，从而对感染提供一定的控制，减少经济损失，某些天然药物成分可以靶向宿主的免疫系统，发挥免疫调节作用，并在一定程度上抑制病毒感染。几项研究已经鉴定了黄芪多糖（APS）和松花粉多糖（PPPS）等化合物，它们可以有效增强鸭免疫力、降低病毒载量和减轻DuCV引起的免疫器官损伤。此外，APS和PPPS显著降低了DuCV诱导的外周血淋巴细胞凋亡。重组鸭IFN-α能明显减轻DuCV感染引起的免疫器官萎缩和免疫抑制等临床症状，而且在实验条件下，重组鸭IFN-α与特异性多克隆抗体联合治疗13天后，成功地阻断了DuCV感染，表明与单一治疗相比，联合治疗在抑制DuCV感染方面具有更好的功效。
4. 防控
由于缺乏疫苗和有效的治疗药物，目前DuCV感染的防控策略主要是加强养殖场管理和严格的鸭群检疫措施。与其他禽类疾病不同，DuCV既不直接导致鸭死亡，也不引起典型的临床症状，而是损害鸭的免疫应答，增强后续的感染和其他微生物的致病性。
因此，养殖户必须注重提高鸭群免疫力，避免混合感染，以防止大规模发病造成的经济损失。研究表明，感染后8天，DuCV在各种器官中稳定存在，因此需要对该病毒采取早期预防和控制措施。比如对禽舍进行常规消毒，例如戊二醛的熏蒸或者臭氧消毒。在废弃物处理方面，建议使用10%福尔马林溶液。如果鸭子死于非正常原因，需要将其处理，并且将同一禽舍内的其余家禽进行隔离和彻底消毒。另外，需要基本疫苗接种，包括禽流感疫苗接种，鸭疫里默式杆菌疫苗的接种，这对鸭群十分重要，保证新鲜、营养的饲料供应是增强鸭群抗病能力的基础，要对鸭群进行定期健康监测和常规检测，对出现异常症状的鸭要及时隔离检查，对鸭群疾病进行全面筛查，防止疫情扩散，减少损失。
5. 结论和未来方向
在DuCV发现后的20年里，其患病率在全球范围内稳步上升，并随着时间的推移而加剧。尽管DuCV引起的单独感染不直接导致疾病症状，由于DuCV具有破坏免疫系统和促进其他病原体感染的倾向，对养鸭业的威胁会逐步体现，因此，加强对DuCV的研究和防控措施至关重要。
目前大部分关于DuCV的研究都来自中国，这表明疫情正在升级。有几个因素可能推动这一趋势。
第一，截至2020年，联合国粮食及农业组织（FAO）的数据表明，世界上大约89%的鸭子种群（估计有11.5亿只）位于亚洲。沿着越南、孟加拉国和印度尼西亚，中国是世界上养鸭最多的国家，这必然导致中国面临着更大的爆发可能性；第二，中国养鸭模式多样，特别是小规模家庭养殖，管理方式往往较为落后，这加剧了病毒传播控制的挑战；第三，缺乏有效的防控措施，加上潜在的病毒变异，可能会放大传染性；第四，缺乏其他国家的相关研究和报告，间接凸显了中国疫情的严重性。
目前关于DuCV研究的讨论揭示了几个重大的差距。
首先，尽管多年来在不同国家和地区进行了零星的调查，但全球范围的调查仍然很少。鉴于DuCV感染通常具有潜伏性，某些地区没有报告病例并不一定意味着没有DuCV感染，而是可能表明检测不足。
其次，尽管广泛的研究已经评估了DuCV的分子流行病学和遗传变异，但是迫切需要进一步探索DuCV的各个方面，例如病毒入侵、复制、致病机制、宿主相互作用和免疫应答。
再者，虽然已经开发了几种诊断方法，其现场应用的可行性和准确性需要验证。
最后，DuCV的连续体外传代尚未成功，靶向DuCV的有效疫苗或药物尚未形成，解决这些问题需要多管齐下。
获得DuCV全球流行率的其他国家数据对于深入了解其传播动力学至关重要，这反过来又可以为有效的预防策略提供信息。
需要对DuCV的致病机制和宿主免疫反应进行更彻底的研究，为疫苗和药物开发奠定理论基础。鉴于圆环病毒科的共性，可以借鉴猪圆环病毒（PCV）的研究模式和方法。
不断优化现有的诊断方法，并且持续开发适合现场使用的快速、简单和精确的诊断技术，是必不可少的。
加速DuCV疫苗和药物的开发和临床验证势在必行。随着科学技术的进步，对DuCV的认识将更加深入，同时制定有效的预防措施，从而大大加强对DuCV感染的控制，确保养鸭业的健康和发展。
本文分享源为：From obscurity to urgency: a comprehensive analysis of the rising threat of duck circovirus.
作者：Lei X等人，于2024年发表于杂志: Veterinary Research.
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| 文章来源：鸭高创咨询 文章编辑：一米优讯 |
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